Resumen

La ALAS es la primera enzima y regulatoria de la biosíntesis del hemo. La insulina regula la expresión de más de 150 genes, pero las bases moleculares de los mecanismos involucrados aún no han sido dilucidadas por completo. Previamente, comprobamos que la insulina ocasiona una rápida inhibición de la expresión de la ALAS hepática y que una o más secuencias presentes en el promotor serían las responsables de mediar la respuesta a la hormona. En este trabajo demostramos que la región comprendida entre los pares de bases -469 y-354 es capaz de conferir sensibilidad a la hormona en un contexto heterólogo de manera dependiente de la orientación. Este fragmento contiene una secuencia con alta homología al IRE (elemento respondedor a insulina), presente en numerosos promotores de genes reprimidos por la hormona y elementos consenso para los factores de transcripción HNF-3. La medición de la actividad promotora de transcripción de diferentes plásmidos ALAS/tk-CAT demostró que la exclusión o la mutación del IRE suprime la regulación hormonal. Resultados obtenidos a partir de ensayos de Northern blot y de transfecciones transientes indican que hay una correlación directa entre la cantidad de HNF-3b presente y la habilidad de la hormona para reprimir el gen de ALAS. En la línea celular HeLa observamos que en presencia de insulina la capacidad reguladora de transcripción que poseen los HNF-3 disminuía significativamente. Esta habilidad se restituye cuando las células cervicales se tratan simultáneamente con insulina e inhibidores de MEK o PI3K. Estos resultados nos permiten especular que los HNF-3 podrían ser blanco de efectores de cascadas de transducción de señales activadas por insulina y responsables de mediar la regulación hormonal tejido específica de ALAS.

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2007-01-25   |   1,654 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)