yrfF (mucM) es un gen esencial para cepas de Salmonella entérica con RCSB funcional

Autores: Costa C.S., Pettinari María Julia, Méndez B.S., Antón D.N.

Resumen

Entre las mutantes de Salmonella enterica serovar Typhimurium LT2 resistentes al antibiótico b-lactámico mecillinam se observan con frecuencia colonias con fenotipo mucoide. La mayoría de estas mutaciones afectan al gen mucM y su fenotipo se debe a la sobreproducción de una cápsula de ácido colánico (CA). La síntesis de CA depende de la expresión del cluster cps, el cual es controlado principalmente por un sistema de phosphorelay cuyo efector es el gen rcsB. El objetivo de este trabajo fue identificar al gen mucM, mapeado previamente en la posición Cs 76. Para ello, un fragmento de DNA adyacente a MudJ en una cepa mucM9::MudJ fue secuenciado, encontrándose que MudJ se hallaba insertado en la región intergénica situada entre los genes divergentes yrfE e yrfF. Esta región más yrfF o yrfE fueron clonados en plásmidos y utilizados en estudios de complementación, observándose que sólo el plásmido que llevaba yrfF fue capaz de complementar las mutaciones mucM. Se construyó una mutante de yrfF mediante inserción de un cassette Kan en el ORF yrfF. Al transducir esta mutación en cepas salvajes sólo se obtuvieron colonias abortivas, mientras que se obtuvieron transductantes normales cuando se utilizaron cepas defectivas para la actividad de RcsB como receptoras. Las mutaciones que interfieren (rcsA) o bloquean (cps, galE) la síntesis de CA no confieren tolerancia a la mutación letal yrfF::Kan, por lo tanto, el efecto letal causado por la inactivación de yrfF, parece estar mediado por una función de rcsB no relacionada con la síntesis de CA.

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2007-01-24   |   1,788 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)